(1006452-0001-0001)尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶的基因序列
(资料说明）从尖吻蝮蛇中分离纯化得到类凝血酶，测定该酶Ｎ端１５个氨基酸的序列，据此设计简并的上游引物，其中含有翻译起始密码子ＡＴＧ，以利于该基因的表达。然后根据与其它蝮属蛇毒类凝血酶３’非编码区同源性较高区域设计简并的下游引物。从毒腺中抽提总ＲＮＡ，用ＰＣＲ扩增出该基因，克隆后经全序列测定表明该成熟蛋白的ｃＤＮＡ编码６９９个核苷酸，即２３３个氨基酸。该基因的成功克隆及基因序列测定为开发基因工程产品创造良好条件。
(1006452-0007-0002)具有止血活性的尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶
(资料说明）
(1006452-0012-0003)新的具有止血活性的尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶
(资料说明）本发明的类凝血酶涉及生物医药和酶学领域。具体地讲，涉及一种从尖吻蝮蛇蛇毒中提取的、具有止血活性酶的结构特征，纯化方法和医药领域用途。该酶全分子量为31KD(SDS-PAGE法)有相近两个亚基16KD和15KD组成，其N端15个氨基酸残基的测序A亚基：DCSSGWSSYEEHQYY，B亚基：DSSGWSSYEGHEYYV。HPLC为单峰。该酶最适温度为35℃，最适pH 7.5，等电点为5.39。用酸水解测得该酶有18或20种氨基酸组成。血浆凝结试验在60±5秒，同时可使纤原凝结。该酶在体内使全血凝固时间显著缩短，不造成血栓形成，用于预防临床手术出血、治疗外伤出血、全身和局部止血及诊断某些临床凝血时间。
(1006452-0008-0004)一种尖吻蝮蛇血凝酶制备方法与用途
(资料说明）本发明公开了一种尖吻蝮蛇血凝酶的制备方法与用途。它包括溶解蛇毒、低温离心、透析、DEAE-Sepharose FF层析、透析、DEAE-SepharoseFF层析及Sephadex G25层析步骤。它从中国特有的尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化得到的尖吻蝮蛇血凝酶，是由A和B两个亚基组成，具有促进血液凝固和止血作用。A和B两个亚基的分子量为15.0KD和14.2KD。A亚基N端第一至25位的氨基酸序列为DCSSGWSSYEGHCYKVFKQSKTWTA，B亚基N端第一至25位的氨基酸序列为DCPSDWSSYECHCYKPDEPKTWEDA。尖吻蝮蛇血凝酶可用于临床上人的各种类型出血的止血。
(1006452-0011-0005)一个新的尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶及其止血活性
(资料说明）本发明的类凝血酶涉及生物医药和酶学领域。具体地讲，涉及一种从尖吻蝮蛇蛇毒中提取的、具有止血活性酶的结构特征，纯化方法和医药领域用途。该酶分子量为37KDa(SDS-PAGE法)，单肽链组成，其N端15个氨基酸残基的序列：Val-Ile-Gly-Gly-Asn-Glu-Cys-Asp-Thr-Asn-Glu-His-Arg-Phe-Leu。HPLC为单峰。该酶最适温度为37℃，最适pH 7.5，等电点为5.86。血浆凝结试验在60±5秒，同时可使纤原凝结，血浆比活大于500U/mg。该酶在体内使全血凝固时间显著缩短，不造成血栓形成，用于预防临床手术出血、治疗外伤出血、全身和局部止血。
(1006452-0010-0006)尖吻蝮蛇毒36KD单链血凝酶及其制备方法
(资料说明）尖吻蝮蛇毒36KD单链血凝酶及其制备方法，涉及尖吻蝮蛇毒(Agkistrodon acutus)血凝酶及制备方法，本发明目的是获取高产量、高效价、低毒性、单链尖吻蝮蛇毒血凝酶。该酶经SDS-PAGE电泳分子量为36KD±2KD单一色带，与SEQ ID NO1所示的单链氨基酸的N末端序列至少有90％的相同性。其制备方法是：取蛇毒加Tris-HCl(pH8.0)缓冲液溶解透析；上清液上Metal Sepharose F.F亲和层析柱收集穿透峰；穿透峰上DEAE-Sepharose F.F离子交换柱收集活性峰；第5峰上Superdex 75柱和Sephacryl S-100分子筛柱收集第2峰；Sephadex G-25柱脱盐、除菌、冻干，得到纯度大于98％的36KD单链血凝酶。本
(1006452-0009-0007)一种尖吻蝮蛇凝血酶的分离纯化方法
(资料说明）本发明公开了一种尖吻蝮蛇凝血酶的分离纯化方法，属于蛇毒蛋白技术领域，分离纯化的方法是：磷酸缓冲液溶解蛇毒→层析柱去除热原后平衡→一次纯化→透析→再次纯化→三次纯化→脱盐→鉴定。本发明的方法利用磷酸缓冲液对尖吻蝮蛇粗毒进行分离纯化，分离纯化的尖吻蝮蛇凝血酶纯度高(大于95％)收率较高(可达6～8％)，可以为尖吻蝮蛇毒的有效利用提供一种新途径。
(1006452-0003-0008)一种尖吻蝮蛇毒凝血酶及其生产方法
(资料说明）
(1006452-0006-0009)尖吻蝮蛇凝血酶用作治疗出血性疾病的药物
(资料说明）
(1006452-0002-0010)尖吻蝮蛇毒凝血酶及其生产方法
(资料说明）
(1006452-0004-0011)中国辽宁省大连蛇岛蝮蛇毒液中类凝血酶基因cDNA序列及其克隆
(1006452-0005-0012)尖吻蝮蛇毒凝血酶原激活剂、其编码序列及用途
制作方法 蝮蛇血凝酶生产加工制备工艺技术 制作工艺蝮蛇血凝酶生产加工制备工艺技术
配方比例 蝮蛇血凝酶生产加工制备工艺技术 技术研究应用参考蝮蛇血凝酶生产加工制备工艺技术
(资料说明）从尖吻蝮蛇中分离纯化得到类凝血酶，测定该酶Ｎ端１５个氨基酸的序列，据此设计简并的上游引物，其中含有翻译起始密码子ＡＴＧ，以利于该基因的表达。然后根据与其它蝮属蛇毒类凝血酶３’非编码区同源性较高区域设计简并的下游引物。从毒腺中抽提总ＲＮＡ，用ＰＣＲ扩增出该基因，克隆后经全序列测定表明该成熟蛋白的ｃＤＮＡ编码６９９个核苷酸，即２３３个氨基酸。该基因的成功克隆及基因序列测定为开发基因工程产品创造良好条件。
(1006452-0007-0002)具有止血活性的尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶
(资料说明）
(1006452-0012-0003)新的具有止血活性的尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶
(资料说明）本发明的类凝血酶涉及生物医药和酶学领域。具体地讲，涉及一种从尖吻蝮蛇蛇毒中提取的、具有止血活性酶的结构特征，纯化方法和医药领域用途。该酶全分子量为31KD(SDS-PAGE法)有相近两个亚基16KD和15KD组成，其N端15个氨基酸残基的测序A亚基：DCSSGWSSYEEHQYY，B亚基：DSSGWSSYEGHEYYV。HPLC为单峰。该酶最适温度为35℃，最适pH 7.5，等电点为5.39。用酸水解测得该酶有18或20种氨基酸组成。血浆凝结试验在60±5秒，同时可使纤原凝结。该酶在体内使全血凝固时间显著缩短，不造成血栓形成，用于预防临床手术出血、治疗外伤出血、全身和局部止血及诊断某些临床凝血时间。
(1006452-0008-0004)一种尖吻蝮蛇血凝酶制备方法与用途
(资料说明）本发明公开了一种尖吻蝮蛇血凝酶的制备方法与用途。它包括溶解蛇毒、低温离心、透析、DEAE-Sepharose FF层析、透析、DEAE-SepharoseFF层析及Sephadex G25层析步骤。它从中国特有的尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化得到的尖吻蝮蛇血凝酶，是由A和B两个亚基组成，具有促进血液凝固和止血作用。A和B两个亚基的分子量为15.0KD和14.2KD。A亚基N端第一至25位的氨基酸序列为DCSSGWSSYEGHCYKVFKQSKTWTA，B亚基N端第一至25位的氨基酸序列为DCPSDWSSYECHCYKPDEPKTWEDA。尖吻蝮蛇血凝酶可用于临床上人的各种类型出血的止血。
(1006452-0011-0005)一个新的尖吻蝮蛇蛇毒类凝血酶及其止血活性
(资料说明）本发明的类凝血酶涉及生物医药和酶学领域。具体地讲，涉及一种从尖吻蝮蛇蛇毒中提取的、具有止血活性酶的结构特征，纯化方法和医药领域用途。该酶分子量为37KDa(SDS-PAGE法)，单肽链组成，其N端15个氨基酸残基的序列：Val-Ile-Gly-Gly-Asn-Glu-Cys-Asp-Thr-Asn-Glu-His-Arg-Phe-Leu。HPLC为单峰。该酶最适温度为37℃，最适pH 7.5，等电点为5.86。血浆凝结试验在60±5秒，同时可使纤原凝结，血浆比活大于500U/mg。该酶在体内使全血凝固时间显著缩短，不造成血栓形成，用于预防临床手术出血、治疗外伤出血、全身和局部止血。
(1006452-0010-0006)尖吻蝮蛇毒36KD单链血凝酶及其制备方法
(资料说明）尖吻蝮蛇毒36KD单链血凝酶及其制备方法，涉及尖吻蝮蛇毒(Agkistrodon acutus)血凝酶及制备方法，本发明目的是获取高产量、高效价、低毒性、单链尖吻蝮蛇毒血凝酶。该酶经SDS-PAGE电泳分子量为36KD±2KD单一色带，与SEQ ID NO1所示的单链氨基酸的N末端序列至少有90％的相同性。其制备方法是：取蛇毒加Tris-HCl(pH8.0)缓冲液溶解透析；上清液上Metal Sepharose F.F亲和层析柱收集穿透峰；穿透峰上DEAE-Sepharose F.F离子交换柱收集活性峰；第5峰上Superdex 75柱和Sephacryl S-100分子筛柱收集第2峰；Sephadex G-25柱脱盐、除菌、冻干，得到纯度大于98％的36KD单链血凝酶。本
(1006452-0009-0007)一种尖吻蝮蛇凝血酶的分离纯化方法
(资料说明）本发明公开了一种尖吻蝮蛇凝血酶的分离纯化方法，属于蛇毒蛋白技术领域，分离纯化的方法是：磷酸缓冲液溶解蛇毒→层析柱去除热原后平衡→一次纯化→透析→再次纯化→三次纯化→脱盐→鉴定。本发明的方法利用磷酸缓冲液对尖吻蝮蛇粗毒进行分离纯化，分离纯化的尖吻蝮蛇凝血酶纯度高(大于95％)收率较高(可达6～8％)，可以为尖吻蝮蛇毒的有效利用提供一种新途径。
(1006452-0003-0008)一种尖吻蝮蛇毒凝血酶及其生产方法
(资料说明）
(1006452-0006-0009)尖吻蝮蛇凝血酶用作治疗出血性疾病的药物
(资料说明）
(1006452-0002-0010)尖吻蝮蛇毒凝血酶及其生产方法
(资料说明）
(1006452-0004-0011)中国辽宁省大连蛇岛蝮蛇毒液中类凝血酶基因cDNA序列及其克隆
(1006452-0005-0012)尖吻蝮蛇毒凝血酶原激活剂、其编码序列及用途
制作方法 蝮蛇血凝酶生产加工制备工艺技术 制作工艺蝮蛇血凝酶生产加工制备工艺技术
配方比例 蝮蛇血凝酶生产加工制备工艺技术 技术研究应用参考蝮蛇血凝酶生产加工制备工艺技术
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